| 硫氧还蛋白促进人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中高效可溶表达 |
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| 引用本文： | 万爱妮,徐栋生,蔡燕飞,陈蕴,金坚,李华钟. 硫氧还蛋白促进人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中高效可溶表达[J]. 食品与生物技术学报, 2019, 38(4): 50-57 |
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| 作者姓名： | 万爱妮 徐栋生 蔡燕飞 陈蕴 金坚 李华钟 |
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| 作者单位： | 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;江南大学药学院 |
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| 摘 要： | 为实现人胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在大肠杆菌中的高效可溶表达,获得大量具生物活性的IGF-1。应用融合PCR技术构建trx-igf1融合基因,克隆至p ET30a载体。重组载体pET30a-Trx-IGF-1转化大肠杆菌C43(DE3),并进行条件优化大量表达可溶性蛋白Trx-IGF-1。利用His标签纯化表达产物,对纯化蛋白进行Western blot与生物活性分析。构建的pET30a-Trx-IGF-1重组载体转化大肠杆菌C43(DE3)后,在30℃培养条件下1 mmol/L IPTG诱导表达5 h,获得大量以可溶形式表达的融合蛋白Trx-IGF-1;采用Ni离子亲和层析,获得纯度达90%以上的融合蛋白,经Western blot检测具有IGF-1抗原活性。生物学活性检测显示,融合蛋白Trx-IGF-1能明显促进NIH3T3细胞增殖及细胞周期进展。本研究应用的载体蛋白Trx,能实现在大肠杆菌中高效可溶表达具生物活性的IGF-1,为包涵体蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达提供借鉴。
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| 关 键 词： | 胰岛素样生长因子-1；硫氧还蛋白；大杨杆菌C43（DE3）；可溶；生物活性 |
Thioredoxin Increases the Efficient and Soluble Expression of Insulin-Like Growth Factor-1 in E.coli |
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| WAN Aini,XU Dongsheng,CAI Yanfei,CHEN Yun,JIN Jian and LI Huazhong. Thioredoxin Increases the Efficient and Soluble Expression of Insulin-Like Growth Factor-1 in E.coli[J]. Journal of Food Science and Biotechnology, 2019, 38(4): 50-57 |
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| Authors: | WAN Aini XU Dongsheng CAI Yanfei CHEN Yun JIN Jian LI Huazhong |
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