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CBM融合位置对AuMan5A酶学性质的影响
引用本文:袁风娇,王春娟,李雪晴,李剑芳,邬敏辰.CBM融合位置对AuMan5A酶学性质的影响[J].食品与生物技术学报,2019,38(4):1-7.
作者姓名:袁风娇  王春娟  李雪晴  李剑芳  邬敏辰
作者单位:江南大学食品学院;江南大学无锡医学院
摘    要:为探讨碳水化合物结合结构域(CBM)不同融合位置对Aspergillus usamii 5家族β-甘露聚糖酶AuMan5A酶学性质的影响,将Thermotoga maritima 27家族CBM分别融合至其C和N末端,构建出融合酶基因Auman5A-cbm27和cbm27-Auman5A。将Auman5A和融合酶基因分别在Pichia pastoris GS115中表达,分析比较表达产物AuMan5A、AuMan5A-CBM27和CBM27-AuMan5A的酶学性质。结果表明:AuMan5A、AuMan5A-CBM27和CBM27-AuMan5A的最适温度Topt分别为70、70℃和60℃;其中AuMan5A-CBM27在68℃及以下保温1 h残余酶活均大于85%,与原酶相比,其热稳定性提高了约8℃,而CBM27-AuMan5A在58℃及以下保持稳定,与原酶相比,降低了2℃。3种酶的最适pH均为4.0;AuMan5A在pH值2.5~7.5范围内保持稳定,2种融合酶在pH 2.0~9.0内均能保持稳定。与AuMan5A相比,AuMan5A-CBM27和CBM27-AuMan5A对角豆胶的Km分别降低了45.0%和26.3%。通过比较3种酶的酶学性质,证实CBM不同融合位置对AuMan5A酶学性质具有重要影响。

关 键 词:β-甘露聚糖酶  碳水化合物结合域  融合位置  酶学性质

Effect of Fusion Position of Carbohydrate-Binding Module on the Enzymatic Properties of AuMan5A
YUAN Fengjiao,WANG Chunjuan,LI Xueqing,LI Jianfang and WU Minchen.Effect of Fusion Position of Carbohydrate-Binding Module on the Enzymatic Properties of AuMan5A[J].Journal of Food Science and Biotechnology,2019,38(4):1-7.
Authors:YUAN Fengjiao  WANG Chunjuan  LI Xueqing  LI Jianfang and WU Minchen
Abstract:
Keywords:
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