致泻性大肠杆菌基因芯片检测方法的建立 |
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引用本文: | 王乃福,吴冬雪,张霞,刘培,张海英,高旗利.致泻性大肠杆菌基因芯片检测方法的建立[J].食品研究与开发,2014(7):5-8. |
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作者姓名: | 王乃福 吴冬雪 张霞 刘培 张海英 高旗利 |
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作者单位: | 天津出入境检验检疫局; |
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基金项目: | 国家质检总局科技计划项目(2010IK193) |
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摘 要: | 建立一种多重PCR技术结合基因芯片检测方法,实现多种致泻性大肠杆菌(EPEC、ETEC、EIEC、EHEC、EAEC和大肠杆菌O157)的快速、准确检测。筛选肠致病性大肠杆菌、产肠毒素大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、肠出血性大肠杆菌、肠聚集性大肠杆菌及大肠杆菌O157的特异基因作为目的基因。设计9对引物和23条探针,进行多重PCR扩增,制备寡核苷酸芯片。将多重PCR扩增产物与带有特异探针的芯片杂交。用扫描仪扫描,判定细菌种类及型别。该基因芯片可特异性的检测EPEC、ETEC、EIEC、EHEC、EAEC和大肠杆菌O157,具有良好的特异性,致病菌检测灵敏度可达104cfu/mL。所建立的多种致泻性大肠杆菌基因芯片方法检测方法特异性好,灵敏度高,具有较好的实用性。
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关 键 词: | 致泻性大肠杆菌 基因芯片 多重PCR |
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