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胆盐水解酶的分离纯化与部分特性研究
引用本文:王玉文, 王延祥, 李平兰, 刘慧, 张燕.胆盐水解酶的分离纯化与部分特性研究[J].中国食品学报,2007,7(5):35-41.
作者姓名:王玉文  王延祥  李平兰  刘慧  张燕
作者单位:1. 中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京,100083
2. 北京农学院食品科学与工程系,北京,102206
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);国家高技术研究发展计划(863计划);国家科技支撑计划
摘    要:为了给胆盐水解酶结构分析及降低血液胆固醇的机理研究提供理论基础,采用硫酸铵分级沉淀、透析、阴离子交换树脂层析等方法对分离自我国传统开菲尔粒中的1株干酪乳杆菌KTx(lactobillus casei KTx)产生的胆盐水解酶进行了纯化,并对其部分特性进行了研究.结果表明在70%的硫酸铵条件下酶蛋白能最大程度地沉淀.采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换树脂层析,流速1.0 mL/min,用0.1 mol/L NaCl-50 mmol/L磷酸缓冲液(pH 6.5)洗脱,比活力可达到115(AU/mg),是原粗酶液的17倍.纯化后的样品经SDS-PAGE电泳,初步确定了胆盐水解酶的分子质量约30 kDa.该酶的最适反应温度35℃,最适pH 6.0,最适反应底物浓度6mmol/L,酶促反应动力学常数4.57 mmol/L.抑制剂对此酶的抑制作用强弱顺序依次为尿素>SDS>EDTA.Al3 对此酶的激活能力最强,其次是Fe3 ,Zn2 对酶活无激活作用.

关 键 词:胆盐水解酶  分离  纯化  特性
文章编号:1009-7848(2007)05-0035-07
修稿时间:2006年10月26

Studies on the Isolation, Purification and Partial Characteristics of Bile Salt Hydrolase
Wang Yuwen,Wang Yanxiang,Li Pinglan,Liu Hui,Zhang Yan.Studies on the Isolation, Purification and Partial Characteristics of Bile Salt Hydrolase[J].Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology,2007,7(5):35-41.
Authors:Wang Yuwen  Wang Yanxiang  Li Pinglan  Liu Hui  Zhang Yan
Abstract:
Keywords:
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