高表达转录因子ZNF191基因的慢病毒颗粒的构建及鉴定 |
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引用本文: | 梁延杰,刘东阳,陆范,厉建中.高表达转录因子ZNF191基因的慢病毒颗粒的构建及鉴定[J].粉末涂料与涂装,2013,26(2):184-187. |
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作者姓名: | 梁延杰 刘东阳 陆范 厉建中 |
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作者单位: | 1. 第二军医大学研究生管理大队,上海,200433 2. 第二军医大学药学院生化药学教研室,上海,200433 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(30871353);第二军医大学大学生创新能力培养基金(MS2011046) |
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摘 要: | 目的构建转录因子ZNF191基因的慢病毒颗粒,为进一步研究ZNF191的生物学功能及其在肿瘤基因治疗方面的应用奠定基础。方法从HEK293细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增ZNF191基因,亚克隆至pLVX-AcGFP-N1质粒中,经酶切及DNA测序鉴定正确后,将含有ZNF191基因的重组质粒pLVX-ZNF191结合辅助质粒转染HEK293T细胞,包装重组慢病毒,Western blot检测感染的293T细胞内ZNF191蛋白的表达。结果酶切及测序鉴定pLVX-ZNF191质粒构建正确,Western blot检测重组慢病毒能显著提高293T细胞的ZNF191蛋白表达水平。结论已成功构建了ZNF191基因重组慢病毒表达载体pLVX-ZNF191,为进一步研究ZNF191的生物学功能及肿瘤的基因治疗奠定了基础。
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关 键 词: | 锌指蛋白 ZNF191基因 慢病毒 |
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