摘 要: | 为利用糖链转移酶反应定量分析糖蛋白N-糖链,首先用d8-1-甲基-4-2,4-二硝基-5-(1-哌嗪基)苯基]哌嗪(d8-PDPZ)与N~ω-(2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖基)-N~α-(叔丁氧羰基)-L-天冬酰胺(Boc-Asn-GlcNAc)缩合反应生成d8-PDPZ-Boc-Asn-GlcNAc,然后d8-PDPZ-Boc-Asn-GlcNAc再与碘甲烷反应合成了新的带正电荷的糖链受体d8-MPDPZ-Boc-Asn-GlcNAc.以Endo-M N175Q为糖链转移酶、SG-Asn为糖基供体,利用UPLC-QTOF-MS对d8-MPDPZ-Boc-Asn-GlcNAc的糖链受体性能进行了初步研究.结果表明,在Endo-M N175Q的催化下,d8-MPDPZ-Boc-Asn-GlcNAc与SG-Asn发生酶促反应,生成糖链转移产物d8-MPDPZ-Boc-Asn-SG.如果优化定量反应的条件,d8-MPDPZ-Boc-Asn-GlcNAc可应用于糖链分析.
|