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一种新孢子虫病实时RPA快速检测方法的建立及应用
引用本文:俞海怡,沈金阳,李姣姣,廖磊,陈仕琦,汤文连,马金鸣,王伟玲,吉敬. 一种新孢子虫病实时RPA快速检测方法的建立及应用[J]. 江苏海洋大学学报(自然科学版), 2021, 30(4): 30-34. DOI: 10.3969/j.issn.2096-8248.2021.04.005
作者姓名:俞海怡  沈金阳  李姣姣  廖磊  陈仕琦  汤文连  马金鸣  王伟玲  吉敬
作者单位:江苏海洋大学药学院,江苏连云港 222005;江苏海洋大学江苏省海洋药物活性分子筛选重点实验室,江苏连云港 222005
基金项目:江苏省高校自然科学基金资助项目;江苏省高校优势学科建设工程资助项目
摘    要:犬新孢子虫(Neospora caninum)引起的新孢子虫病严重影响着养牛业的发展,目前对于该疾病尚无有效治疗的药物或疫苗.为了提高对新孢子虫病的诊断及预防,根据犬新孢子虫中特异性保守基因NC-5建立了一种新型实时RPA检测方法;同时进行了特异性以及敏感性试验,并应用该方法对国内养牛场收集的32份临床样品进行了检测.结果表明:所建立的实时RPA检测方法结果准确、操作便捷,仅需25 min即可得到检测结果.在特异性试验中仅有犬新孢子虫发生了特异性扩增,其余对照病原体在检测中均未有扩增结果;在敏感性试验中最低检测限为37拷贝/反应;在32份临床样品试验中有16份阳性样品,与已有检测技术相比,准确率达100%.说明该方法具有特异性强、灵敏度高、检测时间短等优势,为新孢子虫病的快速检测奠定了基础.

关 键 词:实时重组酶聚合酶等温扩增  犬新孢子虫  分子诊断  快速检测

Establishment and Application of a Real-time RPA Rapid Detection Method for Diagnosis of Neospora caninum Infection
YU Haiyi,SHEN Jinyang,LI Jiaojiao,LIAO Lei,CHEN Shiqi,TANG Wenlian,MA Jinming,WANG Weiling,JI Jing. Establishment and Application of a Real-time RPA Rapid Detection Method for Diagnosis of Neospora caninum Infection[J]. Journal of Jiangsu Ocean University(Natural Sciences Edition), 2021, 30(4): 30-34. DOI: 10.3969/j.issn.2096-8248.2021.04.005
Authors:YU Haiyi  SHEN Jinyang  LI Jiaojiao  LIAO Lei  CHEN Shiqi  TANG Wenlian  MA Jinming  WANG Weiling  JI Jing
Abstract:
Keywords:
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