| 太平洋牡蛎中类FUT10蛋白的原核表达及免疫印迹鉴定 |
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| 引用本文： | 教杨,曲梦,桂彬彬,江艳华,王联珠,姚琳. 太平洋牡蛎中类FUT10蛋白的原核表达及免疫印迹鉴定[J]. 食品安全质量检测学报, 2022, 13(8): 2573-2579 |
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| 作者姓名： | 教杨 曲梦 桂彬彬 江艳华 王联珠 姚琳 |
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| 作者单位： | 大连工业大学食品学院,农业农村部水产品质量安全检测与评价重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,大连工业大学食品学院,农业农村部水产品质量安全检测与评价重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业农村部水产品质量安全检测与评价重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所,农业农村部水产品质量安全检测与评价重点实验室,中国水产科学研究院黄海水产研究所 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划(2017YFC1600703)和中国水产科学研究院基本科研业务费(2020TD71)共同资助 |
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| 摘 要： | 目的 原核表达牡蛎类FUT10(Fucosyl-transferase 10)蛋白并探究与人FUT10的免疫相似性。方法 本研究基于课题组前期克隆完整的类FUT10基因cDNA, 依照大肠杆菌表达蛋白的密码子偏爱性, 利用DNAMAN软件对类FUT10基因开放阅读框序列进行优化并合成, 亚克隆至载体pET-28a(+), 得到重构质粒pET-OFu3, 转入大肠杆菌BL21(DE3), 通过异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后获取目的蛋白, 进行蛋白质印迹法(Western blot)鉴定。结果 在37 ℃、IPTG终浓度为1.0 mmol/L诱导4 h后, 出现蛋白分子量大小约为55 kDa的条带。该蛋白条带与抗6×His(组氨酸)标签抗体、抗人FUT10抗体均能发生特异性结合。结论 优化后的类FUT10蛋白与人体转移酶FUT10具有相似的免疫原性, 类FUT10蛋白的可溶性表达为探究太平洋牡蛎体内Ⅱ型血型抗原合成路径提供研究基础, 进一步探索了牡蛎体内特异性结合诺如病毒的分子机理。
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| 关 键 词： | 太平洋牡蛎 类FUT10基因 类α1,3-岩藻糖基转移酶 原核表达 |
| 收稿时间： | 2021-12-27 |
| 修稿时间： | 2022-04-09 |
Prokaryotic expression and western blot identification of FUT10 protein in Crassostrea gigas |
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| JIAO Yang,QU Meng,GUI Bin-Bin,JIANG Yan-Hu,WANG Lian-Zhu,YAO Lin. Prokaryotic expression and western blot identification of FUT10 protein in Crassostrea gigas[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2022, 13(8): 2573-2579 |
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| Authors: | JIAO Yang QU Meng GUI Bin-Bin JIANG Yan-Hu WANG Lian-Zhu YAO Lin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Crassostrea gigas FUT10-like gene prokaryocyte expression |
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