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水稻瘤矮病毒S3和S8基因共表达杆状病毒转移载体构建及重组病毒的鉴定
引用本文:范国成,高芳銮,黄美英,谢荔岩,吴祖建,林奇英,谢联辉. 水稻瘤矮病毒S3和S8基因共表达杆状病毒转移载体构建及重组病毒的鉴定[J]. Canadian Metallurgical Quarterly, 2011, 40(2)
作者姓名:范国成  高芳銮  黄美英  谢荔岩  吴祖建  林奇英  谢联辉
作者单位:1. 福建农林大学植物病毒研究所,福建福州350002;福建省农业科学院果树研究所,福建福州350013
2. 福建农林大学植物病毒研究所,福建福州350002;福建省植物病毒学重点实验室,福建福州350002
3. 福建农林大学植物病毒研究所,福建福州,350002
基金项目:福建省自然科学基金计划资助项目,青年教师科研基金计划项目
摘    要:为构建携带水稻瘤矮病毒(Rice gall dwarf virus,RGDV)主要内层衣壳蛋白S3基因和外层衣壳蛋白S8基因的重组杆状病毒,将目的基因(S3和S8)分别亚克隆到杆状病毒转移载体pFastBacDual多角体启动子(PH)和p10启动子的下游.经酶切和确证性序列测定,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组杆粒rbpFBDS3-S8,采用脂质体转染法,将rbpFBDS3-S8转染草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)Sf9细胞包装病毒,PCR筛选鉴定重组病毒.结果表明:Sf9昆虫细胞被侵染72 h后,倒置显微镜下观察到细胞增大,培养液和细胞内出现颗粒状物质,部分细胞破裂甚至裂解,说明S3和S8基因已整合到重组杆状病毒基因组中,这为开展RGDV主要结构蛋白在昆虫细胞中的表达及其功能研究奠定了基础.

关 键 词:水稻瘤矮病毒  外层衣壳蛋白  内层衣壳蛋白  杆状病毒表达系统  Sf9昆虫细胞

Construction of baculovirus transfer vector for co-expression of Rice gall dwarf virus gene S3 and S8 and identification of recombinant baculovirus
FAN Guo-cheng,GAO Fang-luan,HUANG Mei-ying,XIE Li-yan,WU Zu-jian,LIN Qi-ying,XIE Lian-hui. Construction of baculovirus transfer vector for co-expression of Rice gall dwarf virus gene S3 and S8 and identification of recombinant baculovirus[J]. Canadian Metallurgical Quarterly, 2011, 40(2)
Authors:FAN Guo-cheng  GAO Fang-luan  HUANG Mei-ying  XIE Li-yan  WU Zu-jian  LIN Qi-ying  XIE Lian-hui
Abstract:
Keywords:
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