| 雌二醇单克隆抗体制备及胶体金侧流层析免疫分析方法的建立 |
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| 引用本文： | 王金魁,丁明月,毛烨炫,宋莲军,黄现青,张西亚. 雌二醇单克隆抗体制备及胶体金侧流层析免疫分析方法的建立[J]. 食品安全质量检测学报, 2023, 14(18): 201-210 |
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| 作者姓名： | 王金魁 丁明月 毛烨炫 宋莲军 黄现青 张西亚 |
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| 作者单位： | 河南农业大学食品科学技术学院,河南农业大学食品科学技术学院,河南农业大学食品科学技术学院,河南农业大学食品科学技术学院,河南农业大学食品科学技术学院,河南农业大学食品科学技术学院 |
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| 基金项目： | 国家自然基金面上项目(32172298); 河南科技攻关项目(222102310162) |
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| 摘 要： | 目的 建立一种牛奶中雌二醇(17β-estradiol, E2)胶体金(colloidal gold, CG)试纸条快速检测方法。方法 从E2的3号位羟基和17号位羟基引入活性基团制备半抗原H1和H2, 偶联载体蛋白制备完全抗原, 经过动物免疫和细胞融合筛选, 制备单克隆抗体, 采用间接竞争酶联免疫吸附实验(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay, icELISA)对单克隆抗体性能进行评估, 筛选出灵敏度最高的单克隆抗体, 最后采用静电吸附法将胶体金标记抗体为探针, 构建牛奶中E2的胶体金试纸条检测方法。结果 制备了H1-7B7、H1-9C7、H2-4A10、H2-2E2 4种单克隆抗体, 经过评估, 选取H1-9C7和H2-OVA作为最优抗体及抗原, 建立的胶体金试纸条消线(cut-off)值为6.00 ng/mL, 半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration, IC50)为1.54 ng/mL, 与苯甲酸雌二醇和雌三醇的交叉反应率分别为101.31%和2.43%。结论 本研究建立的试纸条具有操作简单、灵敏度高等特点, 能够基本满足牛奶中E2快速检测要求。
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| 关 键 词： | 雌二醇 单克隆抗体 间接竞争酶联免疫吸附实验 胶体金侧流层析免疫分析 |
| 收稿时间： | 2023-04-03 |
| 修稿时间： | 2023-09-22 |
Preparation of monoclonal antibodies against estradiol and establishment of colloidal gold lateral flow immunoassay |
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| WANG Jin-Kui,DING Ming-Yue,MAO Ye-Xuan,SONG Lian-Jun,HUANG Xian-Qing,ZHANG Xi-Ya. Preparation of monoclonal antibodies against estradiol and establishment of colloidal gold lateral flow immunoassay[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2023, 14(18): 201-210 |
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| Authors: | WANG Jin-Kui DING Ming-Yue MAO Ye-Xuan SONG Lian-Jun HUANG Xian-Qing ZHANG Xi-Ya |
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| Affiliation: | Henan Agricultural University,College of Food Science and Technology,Zheng Zhou 450002;China,Henan Agricultural University,College of Food Science and Technology,Zheng Zhou 450002;China,Henan Agricultural University,College of Food Science and Technology,Zheng Zhou 450002;China,Henan Agricultural University,College of Food Science and Technology,Zheng Zhou 450002;China,Henan Agricultural University,College of Food Science and Technology,Zheng Zhou 450002;China,Henan Agricultural University,College of Food Science and Technology,Zheng Zhou 450002;China |
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