毕赤酵母工程菌表达猪β-干扰素 |
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作者姓名: | 高智明 赵沁沁 张国华 等 |
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作者单位: | 武汉轻工大学生物与制药工程学院,湖北武汉430023 |
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基金项目: | 湖北省自然科学基金(2008CDB067) |
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摘 要: | 根据毕赤酵母密码子偏爱,人工合成了猪β-干扰素(PoIFN-β)基因,构建了重组载体pPICZA-PoIFN-β。重组载体经Sac I线性化后,电击转入毕赤酵母GS115,对在含博莱霉素(Zeocin)平板上生长的转化子进行鉴定,得到分泌表达猪β-干扰素的毕赤酵母基因工程菌株GS115/pPICZA-PoIFN-β。以1%甲醇诱导GS115/pPICZA-PoIFN-β表达。十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表明,工程菌株实现了猪β-干扰素的高效分泌表达,表达产物为相对分子质量22ku和26ku的混合物,表达蛋白量约为80mg/L。
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关 键 词: | 猪β-干扰素 分泌表达 毕赤酵母 |
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