| 利用DNA重组技术构建产生多聚甘露糖醛酸的突变菌株 |
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| 引用本文： | 沈洪波,韩峰,林育姿,韩文君,于文功.利用DNA重组技术构建产生多聚甘露糖醛酸的突变菌株[J].高技术通讯,2006,16(2):175-180. |
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| 作者姓名： | 沈洪波 韩峰 林育姿 韩文君 于文功 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学海洋药物与食品研究所教育部海洋药物重点实验室,青岛,266003 |
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| 摘 要： | 本文旨在以海洋细菌Pseudomonas sp.QDA褐藻多糖(alginate)生物合成操纵元中的algG基因为靶点,利用DNA重组技术改建褐藻多糖的生物合成途径,以期获得产生甘露糖醛酸的突变菌株.首先,利用PCR克隆algG基因两侧大小分别为1.7kb和1.8kb的DNA片段作为同源片段,用编码Gm抗性的aacC1基因替换algG基因,构建成打靶载体pEX100TUDG.将打靶载体转入QDA,利用Gm抗生素和蔗糖为选择压力进行培养,通过PCR和Southern杂交验证,获得了突变菌株.1H-NMR、PAGE和GPC分析发现,突变菌株胞外产物为多聚甘露糖醛酸.该突变菌株的获得丰富了具有较高药物开发价值的甘露糖醛酸的来源,为褐藻多糖途径工程的进一步研究提供了理论依据和技术支持.
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| 关 键 词： | 多聚甘露糖醛酸 途径工程 假单胞菌 差向异构酶 |
| 收稿时间： | 2005-05-18 |
| 修稿时间： | 2005年5月18日 |
Construction of mannuronan-producing mutant of Pseudomonas sp. QDA using DNA recombination technology |
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| Shen Hongbo,Han Feng,Lin Yuzi,Han Wenjun,Yu Wengong.Construction of mannuronan-producing mutant of Pseudomonas sp. QDA using DNA recombination technology[J].High Technology Letters,2006,16(2):175-180. |
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| Authors: | Shen Hongbo Han Feng Lin Yuzi Han Wenjun Yu Wengong |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Marine Drugs of Ministry of Education, Marine Drug and Food Institute, Ocean University of China, Qingdao 266003 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | inannuronan pathway engineering Pseudomonas strains mannuronan C-5-epimerase |
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