一种酸性真菌α-淀粉酶的异源表达与重组酶性质 |
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引用本文: | 沈微,林丽珍,黄雯雯,郭玉婉,陈献忠,樊游,王正祥.一种酸性真菌α-淀粉酶的异源表达与重组酶性质[J].食品与发酵工业,2013(8):1-6. |
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作者姓名: | 沈微 林丽珍 黄雯雯 郭玉婉 陈献忠 樊游 王正祥 |
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作者单位: | 江南大学工业生物技术教育部重点实验室;淡马锡理工学院应用技术学院;海正药业(杭州)股份有限公司生物技术部;天津市工业微生物重点实验室天津科技大学生物工程学院 |
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基金项目: | 国家863高技术研究发展计划(2013AA102101-5);江苏省科技支撑计划(SBE201270477) |
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摘 要: | 用PCR方法扩增扣囊复膜孢酵母CICIM Y1037菌株真菌α-淀粉酶基因成熟肽编码区(SfA),插入表达载体pPIC9K。重组质粒pPIC9K-SfA转化巴斯德毕赤酵母GS115,筛选获得淀粉酶活力相对最高的重组菌Pichia pastoris GS115/pPIC9K-SfAmy LZ08。SDS-PAGE电泳分析纯化获得的重组酶SfA,结果显示重组酶分子质量为61 kDa左右。SfA最适反应温度为45℃、最适pH为4.5,是一种酸性α-淀粉酶。Ca2+对SfA的热稳定性有促进作用,重组酶在含5 mmol/L Ca2+,pH 4.5的溶液中,55℃保温4 h酶活仍保留80%以上。SfA水解玉米淀粉获得麦芽寡糖和少量葡萄糖,其中麦芽糖和麦芽三糖为主要产物,分别占水解物的37%和39%。重组酶SfA在麦芽三糖和麦芽寡糖糖浆生产中有一定的应用潜力。
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关 键 词: | 扣囊复膜孢酵母 酸性真菌α-淀粉酶 巴斯德毕赤酵母 异源表达 |
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