| 人血清中A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖IgG抗体含量ELISA检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王欣茹,赵志强,李亚南,刘方蕾,于旭博,孔素娟,范锋锋,林纪胜,叶强,谢贵林.人血清中A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖IgG抗体含量ELISA检测方法的建立[J].粉末涂料与涂装,2014(11):1448-1453. |
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| 作者姓名： | 王欣茹 赵志强 李亚南 刘方蕾 于旭博 孔素娟 范锋锋 林纪胜 叶强 谢贵林 |
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| 作者单位： | 兰州生物制品研究所有限责任公司甘肃省疫苗工程技术研究中心;中国食品药品检定研究院;美国阿拉巴马大学伯明翰分校病理学系呼吸道病原参考实验室;中国生物技术股份有限公司 |
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| 摘 要： | 目的建立人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌荚膜多糖Ig G抗体含量的ELISA定量检测方法,并进行验证。方法筛选适用的酶标板,优化抗原包被浓度,确定ELISA检测过程的关键条件,对建立的ELISA方法的特异性、线性、准确性、精密度、最低检测值和稳定性进行验证,并建立实验室质控血清的质控检测范围。结果酶标板的板内CV为9.8%,板间CV为16.4%,符合检测使用要求。免疫血清经多糖吸收后,群特异性抗体含量与同群多糖吸收剂量呈明显的剂量依赖关系。12份美国CDC质控血清中各群Ig G抗体含量与血清的稀释度呈负相关,相关系数(r)和斜率(slope)均接近-1,线性关系良好;检测结果与CDC公布数据一致性良好,一致性相关系数A、C、W135、Y群分别为0.912 5、0.939 6、0.963 7和0.920 6,准确度较好。实验室内部质控血清Men20中各群Ig G抗体含量试验内和试验间精密度分别小于10%和20%,精密度较好;各血清群别的CV值均30%,稳定性较好;A、C、Y、W135群多糖Ig G抗体含量最低检测值分别为0.092、0.118、0.067和0.035μg/ml,质控血清的检测范围分别为:92.49~36.53、37.29~17.69、66.18~25.54和50.15~23.31μg/ml。结论建立了标准化的检测人血清中抗A、C、Y、W135群脑膜炎球菌多糖Ig G抗体含量的定量ELISA方法,并确定了实验室日常用质控血清Men20的质控检测值范围。
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| 关 键 词： | 脑膜炎球菌 荚膜多糖 抗体 酶联免疫吸附试验 |
Development of ELISA method for IgG content specific to meningococcal capsular polysaccharide of groups A,C,Y and W135 |
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