荧光MIRA法快速检测食品中产气荚膜梭菌

目的 基于荧光多酶恒温快速扩增（MIRA）技术，建立一种快速准确检测食品中产气荚膜梭菌的方法。方法 利用产气荚膜梭菌共有α毒素编码基因plc保守序列设计引物探针，并建立和优化荧光MIRA方法；提取17种非目标菌基因组DNA进行方法特异性验证；梯度稀释目标菌基因组DNA和菌液用于方法灵敏度评价；选取4种食品进行基质干扰试验，评估方法的稳定性；检测实际样品并与国家标准方法进行比较，以验证该方法的实用性。结果 该方法特异性强，检测多种非目标致病菌均呈阴性反应；灵敏度高，以基因组DNA为模板和菌液为模板时最低检测限分别为1.05×101 fg/μL和7.5×100 CFU/mL；该方法不受基质影响，抗干扰能力强；耗时短，约20 min即可完成检测。结论 本研究中的荧光MIRA方法快速准确、灵敏度高、特异性强，可用于食品中产气荚膜梭菌的快速检测。