离子液体辅助纤维素酶Tma Cel5A降解黄原胶的性能

黄原胶因其致密的结构导致酶法的降解效率很低，离子液体能够打开多糖的致密结构而使其处于无序松散的状态，为确定离子液体能够辅助酶更好地降解黄原胶，将来源于Thermatoga maritima的纤维素内切酶Tma Cel5A的基因序列Cel5A进行全基因合成同时对密码子进行了优化，合成产物pET-Cel5A于大肠杆菌中表达。编码基因Cel5A长度为951 bp,纤维素内切酶Tma Cel5A理论分子质量为37 ku。SDS-PAGE结果表明该酶为可溶性表达。酶学性质结果显示该酶最适温度为45℃,最适pH为5.0。以黄原胶作为底物测定Tma Cel5A对离子液体的耐受性，结果表明Tma Cel5A对[Bmim]Cl、[Emim]OCOOH、[Emim]DEP均有一定的耐受性。离子色谱及红外光谱对寡糖检测结果表明，低剂量的离子液体能够辅助Tma Cel5A降解黄原胶生成更多寡糖。实验证实离子液体能够辅助酶法高效降解黄原胶制备黄原胶寡糖。