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康氏木霉诱变菌株纤维素酶系的分离纯化与酶学特性研究
引用本文:葛飞,石贝杰,唐尧,朱龙宝,李婉珍,陶玉贵.康氏木霉诱变菌株纤维素酶系的分离纯化与酶学特性研究[J].现代食品科技,2015,31(12):149-155.
作者姓名:葛飞  石贝杰  唐尧  朱龙宝  李婉珍  陶玉贵
作者单位:(安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖 241000),(安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖 241000),(安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖 241000),(安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖 241000),(安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖 241000),(安徽工程大学生物与化学工程学院,安徽芜湖 241000)
基金项目:国家自然科学基金项目(30270135);安徽省高等学校省级自然科学研究重点项目(KJ2013A049)
摘    要:探讨来源于康氏木霉诱变菌株SG0026 10L发酵罐发酵液中纤维素酶系的分离纯化过程及其酶学性质。采用硫酸铵盐析、Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析柱和CM-Sepharose FF阳离子交换层析等分离纯化技术,从康氏木霉诱变菌株发酵液中分离纯化得到3个电泳纯的纤维素酶系组分(内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶)。对纯化的电泳纯内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶的酶活进行测定,发现3种酶的比活力分别为4.67±0.06 IU/mg、5.16±0.08 IU/mg和12.52±0.12 IU/mg。采用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)确定其分子量,发现其分子量分别为78.1、91.2和83.1k Da。利用Linewaeaver-Burk法对3种酶的动力学参数进行测定,发现3种酶的Km值分别为3.84、6.62和6.21 mg/m L,Vmax值分别为2.29、1.74和2.19 mg/(min·m L)。在此基础上,对3种酶的反应温度和pH进行了研究,发现3种酶的最适反应温度分别为50、50和55℃,最适反应pH均为5.0。

关 键 词:纤维素酶  康氏木霉  纯化  酶学性质
收稿时间:5/9/2015 12:00:00 AM

Isolation, Purification, and Enzymatic Properties of Cellulase System in Mutant Strain Trichoderma koningii SG0026
GE Fei,SHI Bei-jie,TANG Yao,ZHU Long-bao,LI Wan-zhen and TAO Yu-gui.Isolation, Purification, and Enzymatic Properties of Cellulase System in Mutant Strain Trichoderma koningii SG0026[J].Modern Food Science & Technology,2015,31(12):149-155.
Authors:GE Fei  SHI Bei-jie  TANG Yao  ZHU Long-bao  LI Wan-zhen and TAO Yu-gui
Affiliation:(Department of Biological and Chemical Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, China),(Department of Biological and Chemical Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, China),(Department of Biological and Chemical Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, China),(Department of Biological and Chemical Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, China),(Department of Biological and Chemical Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, China) and (Department of Biological and Chemical Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, China)
Abstract:
Keywords:cellulase  Trichoderma koningii  purification  enzymatic properties
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