WRK对枯草芽孢杆菌NX-2产出的γ-谷氨酰转肽酶的不可逆抑制动力学 |
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作者姓名: | 肖彦羚 周治 姚忠 宋希文 佘维娜 刘步云 徐虹 韦萍 |
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作者单位: | 南京工业大学,食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,食品与轻工学院,江苏,南京,210009;南京工业大学,食品与轻工学院,江苏,南京,210009 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划资助(2009CB724706) |
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摘 要: | γ-谷氨酰转肽酶(GGT;EC2.3.2.2)催化的酰基转移反应可用于制备各种具有生理活性的谷氨酰化合物,对其开展酶活力不可逆抑制动力学研究对于阐明GGT的作用机制具有重要意义。今以化学抑制剂Woodward's Reagent K(WRK)与枯草芽孢杆菌NX-2产出的GGT进行不可逆抑制反应,根据邹氏理论测得WRK对GGT不可逆抑制反应的微观速率常数ki为0.03015s-1,WRK与酶结合常数KI为1.352mmol·L-1。有抑制剂存在下GGT与供体γ-谷氨酰对硝基苯胺的亲和力常数Km*=3.245mmol·L-1,GGT酰基化最大反应速度Vmax*=0.3771mmol·(L·s)-1。通过对GGT的失活动力学分析得到,失活反应级数为1.313,说明在GGT活性部位至少有一个谷氨酸(或天冬氨酸)残基参与催化反应。
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关 键 词: | γ-谷氨酰转肽酶 不可逆抑制 动力学 WRK |
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