| 狂犬病病毒糖蛋白基因重组逆转录病毒的构建及其免疫效果 |
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| 引用本文： | 赵娜,张守峰,胡永浩,包世俊,王颖,张菲,刘晔,扈荣良.狂犬病病毒糖蛋白基因重组逆转录病毒的构建及其免疫效果[J].粉末涂料与涂装,2010,23(4). |
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| 作者姓名： | 赵娜 张守峰 胡永浩 包世俊 王颖 张菲 刘晔 扈荣良 |
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| 作者单位： | 赵娜(甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070;军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062);张守峰,王颖,张菲,刘晔,扈荣良(军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130062);胡永浩,包世俊(甘肃农业大学动物医学院,兰州,730070) |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的构建狂犬病病毒SRV9株糖蛋白(GP)基因的重组逆转录病毒,并检测其对小鼠的免疫效果。方法酶切含狂犬病病毒SRV9株GP基因的质粒pVAX-G,将其克隆至逆转录病毒载体,构建重组质粒pLNCX-G,以脂质体介导转染包装细胞系PA317,筛选阳性细胞克隆并扩大培养。将病毒颗粒感染BHK细胞,采用PCR和RT-PCR法检测GP基因在细胞中的整合及转录,在NIH3T3细胞上测定病毒滴度。以重组逆转录病毒免疫昆明小鼠,通过荧光抗体病毒中和试验(FAVN)法检测小鼠血清抗狂犬病病毒中和抗体效价。结果所构建的重组质粒pLNCX-G经酶切鉴定正确;狂犬病病毒GP基因已整合至BHK细胞基因组中并能正常转录;病毒滴度最高可达1.2×104CFU/ml;肌肉和腹腔注射均可使部分小鼠产生抗狂犬病病毒中和抗体,其阳转率分别为6.7%和86.7%,有效保护率分别为0和76.9%。结论已成功构建了狂犬病病毒SRV9株GP基因的重组逆转录病毒,并可诱导小鼠产生一定的中和抗体,为进一步研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 狂犬病病毒 糖蛋白 逆转录病毒 免疫效果 |
Construction and Immune Effect of Recombinant Retrovirus Containing Glycoprotein Gene of Rabies Virus |
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| ZHAO Na,ZHANG Shou-feng,HU Yong-hao,et al.Construction and Immune Effect of Recombinant Retrovirus Containing Glycoprotein Gene of Rabies Virus[J].Chinese Journal of Biologicals,2010,23(4). |
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| Authors: | ZHAO Na ZHANG Shou-feng HU Yong-hao |
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| Affiliation: | ZHAO Na,ZHANG Shou-feng,HU Yong-hao,et al(Gansu Agriculture University,Lanzhou 730070,China) |
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| Abstract: | Objective To construct a recombinant retrovirus containing the glycoprotein(GP)gene of rabies virus and determine its immune effect in mice. Methods Plasmid pVAX-G containing the GP gene of rabies virus SRV9 strain was digested with restriction endonuclease, and the obtained gene fragment was cloned into retrovirus vector. The constructed recombinant plasmid pLNCX-G was transfected to packaging cell line PA317 in mediation of liposome, and positive cell clones were screened for cloning and amplification. BH... |
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| Keywords: | Rabies virus Glycoprotein(GP) Retrovirus Immune effect |
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