| 肠道病毒71型多克隆抗体F(ab’)2片段的制备及其体外中和效果评价 |
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| 引用本文： | 岳磊,朱凡丽,李华,杨婷,谢天宏,龙润乡,杨蓉,罗芳宇,谢忠平. 肠道病毒71型多克隆抗体F(ab’)2片段的制备及其体外中和效果评价[J]. 中国生物制品学杂志, 2016, 0(4): 384-388 |
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| 作者姓名： | 岳磊 朱凡丽 李华 杨婷 谢天宏 龙润乡 杨蓉 罗芳宇 谢忠平 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 |
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| 基金项目： | 云南省应用基础研究计划面上项目(2013FZ135,2013-FZ134) |
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| 摘 要： | 目的制备肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)多克隆抗体F(ab’)2片段,并评价其体外中和效果。方法采用硫酸铵分级沉淀法从EV71感染的兔血清中提取Ig G,用胃蛋白酶进行酶解,正交试验确定最佳酶解条件;使用阴离子交换层析(Q Sepharose Fast Flow)纯化得到F(ab’)2片段,采用体外中和试验检测其对EV71的中和效果。结果硫酸铵分级沉淀法得到电泳纯的Ig G;最佳酶解条件为:胃蛋白酶与Ig G按1∶10的质量比混合,47℃反应4 h,在此条件下,F(ab’)2的产率最大值为79.51%,且方差分析表明,酶切比例对F(ab’)2产率的影响最大,温度次之,时间对F(ab’)2产率的影响不明显;经阴离子交换层析纯化,可有效去除Fc片段,得到电泳纯的F(ab’)2;F(ab’)2具有与Ig G、正常血清同等的中和效果。结论成功制备了EV71兔多克隆抗体F(ab’)2片段,初步确定该F(ab’)2片段具有良好的体外中和效果。
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| 关 键 词： | 肠道病毒71型 多克隆抗体 F(ab’)2片段 正交试验 中和效果 |
Preparation and in vitro neutralizing effect of F(ab')2 fragment of polyclonal antibody against enterovirus 71 |
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| YUE Lei;ZHU Fan-li;LI Hua;YANG Ting;XIE Tian-hong;LONG Run-xiang;YANG Rong;LUO Fang-yu;XIE Zhong-ping. Preparation and in vitro neutralizing effect of F(ab')2 fragment of polyclonal antibody against enterovirus 71[J]. Chinese Journal of Bilogicals, 2016, 0(4): 384-388 |
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| Authors: | YUE Lei ZHU Fan-li LI Hua YANG Ting XIE Tian-hong LONG Run-xiang YANG Rong LUO Fang-yu XIE Zhong-ping |
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| Affiliation: | YUE Lei;ZHU Fan-li;LI Hua;YANG Ting;XIE Tian-hong;LONG Run-xiang;YANG Rong;LUO Fang-yu;XIE Zhong-ping;Institute of Medical Biology, Peking Union Medical College, Chinese Academy of Medical Science; |
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