| 杏鲍菇原生质体制备、再生及其遗传转化体系的建立 |
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| 引用本文： | 邹优花,连玲丹,钟武杰,杜敏如,黄颖茵,王杰. 杏鲍菇原生质体制备、再生及其遗传转化体系的建立[J]. 食品研究与开发, 2023, 44(21): 138-144 |
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| 作者姓名： | 邹优花 连玲丹 钟武杰 杜敏如 黄颖茵 王杰 |
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| 作者单位： | 华南农业大学食品学院，广东 广州 510642 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31772020） |
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| 摘 要： | 为优化杏鲍菇GIM5.344 原生质体的制备、再生条件及建立稳定有效的遗传转化体系，对裂解酶、酶解温度、酶解时间、再生培养基稳渗剂等原生质体制备、再生条件以及潮霉素浓度、聚乙二醇（polyethylene glycol，PEG）介导转化方法进行优化，探究不同原生质体制备、再生条件对原生质体产量和再生率的影响。结果表明：选用溶壁酶1 进行酶解效果最佳，当酶解温度30 ℃、酶解时间2 h、再生培养基稳渗剂为甘露醇时，原生质体的产量可达到7×108 CFU/mL，再生率达到0.40%。得到转化子最多的转化方法为固体预培养+双层培养法，即PEG 介导转化后在无抗性再生培养基上28 ℃预培养48 h，然后再添加一层含有30 μg/mL 潮霉素的培养基进行拟转化子的筛选。所得转化子中的绿色荧光蛋白基因能稳定有效表达。
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| 关 键 词： | 杏鲍菇；原生质体；制备；再生；转化体系 |
| 收稿时间： | 2023-03-18 |
Preparation and Regeneration of Protoplasts of Pleurotus eryngii and Establishment of Its Genetic Transformation System |
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| ZOU Youhu,LIAN Lingdan,ZHONG Wujie,DU Minru,HUANG Yingyin,WANG Jie. Preparation and Regeneration of Protoplasts of Pleurotus eryngii and Establishment of Its Genetic Transformation System[J]. Food Research and Developent, 2023, 44(21): 138-144 |
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| Authors: | ZOU Youhu LIAN Lingdan ZHONG Wujie DU Minru HUANG Yingyin WANG Jie |
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