首批HEK293细胞DNA含量测定国家标准品的制备

目的 制备HEK293细胞DNA含量测定用国家标准品，以期为行业内HEK293细胞残余DNA的测定提供支持。方法 使用Genomic-tip 500/G以及基因组DNA纯化试剂制备HEK293细胞DNA，以其为标准物质原料，采用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法进行纯度和含量筛选，随后稀释至浓度约为100 ng/μL后，按160μL/支进行分装。组织5家不同实验室，采用紫外分光光度法进行协作标定，并评价其稳定性和适用性。结果 制备的HEK293细胞DNA国家标准品经检测，A₂₆₀/A₂₈₀均在1.8～2.0之间，电泳图谱为单一条带，符合规定。该标准品经5家实验室协作标定，共得到78个有效数据，平均含量为104.8 ng/μL，相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为4.2%，均数的95%可信区间为103.8～105.8 ng/μL，单次测定的95%参考值范围为96.0～113.6 ng/μL，平均可信限率为1.0%，推荐保存条件为-80℃。采用2个不同型号的荧光定量PCR仪进行适用性研究，该标准品在0.3...