| 犬细小病毒VP2蛋白重组人5型腺病毒的构建 |
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| 引用本文： | 杨洋,宫婷,米立娟,赵敬慧,陈奇,钱方,刘晔,张守峰,扈荣良.犬细小病毒VP2蛋白重组人5型腺病毒的构建[J].粉末涂料与涂装,2013,26(5):599-602. |
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| 作者姓名： | 杨洋 宫婷 米立娟 赵敬慧 陈奇 钱方 刘晔 张守峰 扈荣良 |
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| 作者单位： | 1. 吉林大学畜牧兽医学院,吉林长春,130062
2. 军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,吉林长春,130122 |
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| 基金项目： | 国家863项目(项目编号：2011AA10A212) |
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| 摘 要： | 目的构建犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)VP2蛋白重组人5型腺病毒。方法将从CPV中PCR扩增的VP2基因克隆至穿梭质粒pacAd5 CMVK-NpA中,经酶切及测序鉴定,将构建正确的重组穿梭质粒pacAd5-cVP2与骨架质粒pacAd5 9.2-100经PacⅠ酶切线性化,共转染293AD细胞,进行同源重组,包装出重组腺病毒rAd5v-cVP2,按Karber法计算重组腺病毒的病毒滴度(TCID50)。电镜下观察重组腺病毒的形态;RT-PCR及Western blot法检测CPV VP2基因mRNA的转录及蛋白的表达水平。结果重组穿梭质粒pacAd5-cVP2经酶切及测序证明构建正确;包装出的重组腺病毒rAd5v-cVP2的病毒滴度可稳定在108.25TCID50/ml;电镜下观察可见典型的腺病毒外型特征;重组腺病毒感染的293AD细胞可检测到VP2基因的转录和表达。结论已成功构建了CPV VP2蛋白重组人5型腺病毒。
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| 关 键 词： | 细小病毒 犬 VP2基因 腺病毒 人 |
Construction of recombinant human adenovirus 5 with VP2 protein of canine parvovirus |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Parvovirus canine VP2 gene Adenovirus human |
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