乙肝病毒X蛋白对肝前体细胞中β-连环素表达及定位的影响 |
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引用本文: | 申利红,芦永良,李红丽,吴迪,冯涛,黄佳祎.乙肝病毒X蛋白对肝前体细胞中β-连环素表达及定位的影响[J].粉末涂料与涂装,2013,26(5):603-607. |
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作者姓名: | 申利红 芦永良 李红丽 吴迪 冯涛 黄佳祎 |
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作者单位: | 1. 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆400016;重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室,重庆400016 2. 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆,400016 3. 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆400016;重庆医科大学病理生理学教研室,重庆400016 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(项目编号:81071770),青年科学基金项目(项目编号:81201679) |
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摘 要: | 目的探讨乙肝病毒X蛋白(Hepatitis B Virus X,protein,HBx)对肝前体(Hepatic progenitor,HP)14-19细胞中β-连环素(β-catenin)表达及定位的影响,为研究HBV相关性肝癌的发生机制提供实验依据。方法分别用重组腺病毒Ad-GFP-HBx和Ad-GFP感染HP 14-19细胞,RT-RCR法检测HBx基因mRNA的转录;Real-time PCR法检测β-catenin基因mRNA的水平;Western blot法检测HBx、总糖原合成酶激酶3β(total-glycogen synthase kinase 3β,t-GSK3β)、磷酸化GSK3β(Phospho-GSK3β,p-GSK3β)及β-catenin蛋白的表达;免疫细胞化学法检测β-catenin的分布情况。结果重组腺病毒Ad-GFP-HBx和Ad-GFP均能高效感染HP 14-19细胞,感染效率均可达到90%;在重组腺病毒Ad-GFP-HBx感染的HP 14-19细胞中可检测到HBx基因mRNA的转录和蛋白的表达;与Ad-GFP感染组相比,Ad-GFP-HBx感染组t-GSK3β蛋白相对表达量无明显变化(P>0.05),但p-GSK3β蛋白相对表达量增加(P<0.05);β-catenin在基因和蛋白水平上表达明显增高(P<0.05),并在胞质中大量积聚,且有向胞核转位的趋势。结论 HBx可通过促进HP 14-19细胞中GSK3β磷酸化,抑制β-catenin的降解,从而导致β-catenin在胞质中大量积聚并向核内转移。HBx对肝前体细胞中经典Wnt信号通路的激活,可能是导致肝前体细胞恶性转化的分子基础。
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关 键 词: | 乙型肝炎病毒X蛋白 β-连环素 肝前体细胞 肝癌 Wnt信号通路 |
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