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| 3-甾酮-△^-脱氢酶的融合表达及纯化 | |
| 作者姓名： | 李玉 路福平 李斌 杜连祥 |
| 作者单位： | 天津科技大学生物工程学院天津市工业微生物重点实验室,天津300222 |
| 摘 要： | 3-甾酮-△^1-脱氢酶是甾体母核降解的关键酶。能催化3-甾酮化合物在C1.2位处脱氢，提高原有底物的生物活性。利用表达载体pET-30a，实现了简单节杆菌3-甾酮-△^-脱氢酶在大肠杆菌BL21（DE3）中的高效表达。利用SDS-PAGE分别对超声破碎后的上清和沉淀进行分析．并用分光先度法检测酶的活力。结果表明，表达出的蛋白主要以无活性的包涵体形式存在。利用Ni离子螯合层析的方法纯化融合蛋白，复性后的酶活比简单节杆菌提高了近10倍。 |
| 关 键 词： | 3-甾酮-△^1-脱氢酶 融合表达 包涵体 转化 |
| 文章编号： | 1672-5425（2006）09-0034-04 |
| 收稿时间： | 2006-07-10 |
| 修稿时间： | 2006-07-10 |
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