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重组枯草芽孢杆菌素subtilosin A基因的合成及其在毕赤酵母中的表达
作者姓名:陈柏雄  黄佳俊  林俊芳  郭丽琼  陈俊飞  刘英丽
作者单位:华南农业大学食品学院生物工程系华南农业大学食品生物技术研究所;齐鲁工业大学化学与制药工程学院;北京工商大学食品质量与安全北京实验室
基金项目:广东省科技计划项目(2015A020209121);广州市科技计划项目(2015Y1-00173);北京市教委一般项目(SQKM201610011004)
摘    要:人工改造并合成subtilosin A的结构基因(rsbo A),并在毕赤酵母中诱导表达重组蛋白。结果表明:经阳性大肠杆菌转化子菌落PCR和测序鉴定,表明重组质粒p PIC9K-sbo构建正确;经阳性酵母转化子的菌落PCR产物电泳检测,可见清晰目的基因条带,证明重组酵母GS115-p PIC9K-sbo构建正确;经枯草芽孢杆菌素蛋白电泳检测,可见明显蛋白条带,表明重组rsbo A基因在毕赤酵母GS115中获得了分泌表达。在抑菌效果检测中,重组酵母工程菌的发酵液对铜绿假单胞菌具有一定的抑菌活性。本研究开创了有望替代抗生素的小分子肽细菌素异源表达新思路,为枯草芽孢杆菌素subtilosin A的工业化生产奠定了基础。

关 键 词:subtilosin A  基因重组  毕赤酵母  抗菌活性
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