抗Trastuzumab单克隆抗体制备及其双抗体夹心ELISA检测方法的建立 |
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作者姓名: | 王延涛 赵喜红 王锐 |
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作者单位: | 黑龙江哈尔滨哈药集团生物工程有限公司,哈尔滨,150025;黑龙江哈尔滨哈药集团技术中心,哈尔滨,150025 |
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摘 要: | 本研究利用曲妥珠单抗(Trastuzumab)4次腹腔免疫 6-8 周龄BALB/c 雌性小鼠.通过淋巴细胞杂交瘤技术、间接ELISA 筛选技术及腹水制备等技术制备并获得抗Trastuzumab单克隆抗体.试验结果表明,通过细胞融合获得了一株能稳定分泌抗Trastuzumab的杂交瘤细胞株A6E8,其制备的腹水单克隆抗体纯化后效价为256000,该抗体属于IgG1亚类,链的类型为k链.利用制备的单克隆抗体(McAb)建立Trastuzumab双抗体夹心ELISA检测方法,试验结果显示,该检测方法特异性良好,不与其他抗体及蛋白发生交叉反应,所建立的Trastuzumab双抗体夹心ELISA 方法最低检测限为1ng/mL.
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关 键 词: | Trastuzumab 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA 药物代谢动力学 |
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