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牛γ-干扰素基因在大肠杆菌中的克隆
引用本文:潘志明,孙辉,王运吉.牛γ-干扰素基因在大肠杆菌中的克隆[J].大连轻工业学院学报,2005,24(2):106-109.
作者姓名:潘志明  孙辉  王运吉
作者单位:大连轻工业学院生物与食品工程学院,大连轻工业学院生物与食品工程学院,大连轻工业学院生物与食品工程学院 辽宁大连 116034,辽宁大连 116034,辽宁大连 116034
摘    要:根据牛γ-干扰素(bouIFN-γ)基因的cDNA序列设计了一对引物。应用一步法逆转录.聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从奶牛脾脏淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段,将RT—PCR产物克隆到pMD18-T载体中,经过限制性酶切分析、测序证实扩增得到的bovIFN-γ基因序列正确。将该基因片段切下并克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,将pGEX-4T-1/bouIFN-γ转化到大肠杆菌中DH5a中。

关 键 词:大肠杆菌  γ-干扰素基因  克隆  IFN-γ  聚合酶链式反应  限制性酶切分析  脾脏淋巴细胞  PCR产物  序列设计  cDNA  总RNA  基因序列  表达载体  基因片段  逆转录  一步法  特异性  T载体  引物  测序
文章编号:1005-4014(2005)02-0106-04
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