牛γ-干扰素基因在大肠杆菌中的克隆 |
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作者姓名: | 潘志明 孙辉 王运吉 |
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作者单位: | 大连轻工业学院生物与食品工程学院,大连轻工业学院生物与食品工程学院,大连轻工业学院生物与食品工程学院 辽宁大连 116034,辽宁大连 116034,辽宁大连 116034 |
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摘 要: | 根据牛γ-干扰素(bouIFN-γ)基因的cDNA序列设计了一对引物。应用一步法逆转录.聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从奶牛脾脏淋巴细胞的总RNA中扩增出特异性片段,将RT—PCR产物克隆到pMD18-T载体中,经过限制性酶切分析、测序证实扩增得到的bovIFN-γ基因序列正确。将该基因片段切下并克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-4T-1中,将pGEX-4T-1/bouIFN-γ转化到大肠杆菌中DH5a中。
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关 键 词: | 大肠杆菌 γ-干扰素基因 克隆 IFN-γ 聚合酶链式反应 限制性酶切分析 脾脏淋巴细胞 PCR产物 序列设计 cDNA 总RNA 基因序列 表达载体 基因片段 逆转录 一步法 特异性 T载体 引物 测序 |
文章编号: | 1005-4014(2005)02-0106-04 |
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