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重组牛凝乳酶基因在Bacillus megaterium WH320中的表达及其酶学性质研究
引用本文:李勇,刘文雯,朱浩君,黄日波.重组牛凝乳酶基因在Bacillus megaterium WH320中的表达及其酶学性质研究[J].中国乳品工业,2013,41(4):4-6.
作者姓名:李勇  刘文雯  朱浩君  黄日波
作者单位:1. 广西大学生命科学与技术学院,南宁,530004
2. 广西科学院工业生物技术研究中心,南宁,530005
3. 广西大学生命科学与技术学院,南宁530004; 广西科学院工业生物技术研究中心,南宁530005
摘    要:对牛凝乳酶基因进行密码子优化,并首次在高效表达宿主巨大芽孢杆菌中表达。通过克隆牛凝乳酶基因,将片段与穿梭质粒pHIS1525连接,连接产物转化大肠杆菌XL-10,筛选出阳性克隆子,所获重组质粒经酶切、测序鉴定,证实含目的片段。通过原生质体转化的方法转化到表达宿主巨大芽孢杆菌WH320。用木糖诱导表达,离心取上清经镍柱亲和层析(Ni-NTA)和聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)分离纯化并鉴定,测定重组牛凝乳酶的酶学性质,表明在巨大芽孢杆菌中得到有效表达。为我国利用生物工程技术的方法自主生产凝乳酶提供了基础。。

关 键 词:重组凝乳酶  巨大芽孢杆菌  酶学性质

Expression of bovine chymosin gene in Bacillus megaterium WH320 and characterization of recombinant enzyme
LI Yong , LIU Wen-wen , ZHU Hao-jun , HUANG Ri-bo.Expression of bovine chymosin gene in Bacillus megaterium WH320 and characterization of recombinant enzyme[J].China Dairy Industry,2013,41(4):4-6.
Authors:LI Yong  LIU Wen-wen  ZHU Hao-jun  HUANG Ri-bo
Affiliation:1,2(1.College of Life Science and Technology Guangxi University,Nanning 530004 China;2.Industrial Bio-Technology Research Center Guangxi Academy of Sciences,Nanning 530005 China)
Abstract:
Keywords:
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