| 梯型熔解温度等温扩增检测食品中植物源成分的内标方法构建 |
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| 引用本文： | 王德国,张萌,王永真,张永清,孙军涛,郭孝辉,肖付刚. 梯型熔解温度等温扩增检测食品中植物源成分的内标方法构建[J]. 食品安全质量检测学报, 2021, 12(21): 8439-8445 |
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| 作者姓名： | 王德国 张萌 王永真 张永清 孙军涛 郭孝辉 肖付刚 |
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| 作者单位： | 许昌学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室,河南科技大学 食品与生物工程学院,许昌学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室,许昌学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室,许昌学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室,许昌学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室,许昌学院河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 河南省科技计划项目(182102110285、202102310468) |
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| 摘 要： | 目的 为梯型熔解温度核酸等温扩增(ladder-type melting temperature isothermal amplification, LMTIA)检测食品中植物源特异性基因建立内标方法, 同时可作为检测肉制品中植物成分的LMTIA方法。方法 针对植物ITS的共有序列, 设计LMTIA引物, 优化反应温度, 测定灵敏度, 并评估淀粉制品、蜂蜜、食用油DNA提取方法与LMTIA检测方法的适应性, 以H2O、鸭肉、鸡肉、羊肉、猪肉和牛肉基因组为阴性对照测试LMTIA方法的假阳性。结果 所建LMTIA方法在最优温度57 ℃时, 灵敏度为10 pg/μuL 玉米基因组与10 pg/μL玉米基因组, 可检出肉制品掺入0.1%的玉米淀粉, 并且所选淀粉制品、蜂蜜、食用油DNA提取方法均适用于LMTIA检测, 并且所有阴性对照样品在测试中均未出现假阳性。结论 本研究建立了LMTIA检测食品中植物源特异性基因的内标方法, 排除了DNA提取引起的LMTIA检测的假阴性, 同时为肉制品中植物成分定性检测建立了LMTIA方法。
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| 关 键 词： | 梯型熔解温度等温扩增(LMTIA) 植物源成分 特异性基因 内标方法 DNA提取方法 |
| 收稿时间： | 2021-06-01 |
| 修稿时间： | 2021-10-31 |
Establishment of internal standard method for detection of plant-derived components in food with ladder-type melting temperature isothermal amplification |
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| WANG De-Guo,ZHANG Meng,WANG Yong-Zhen,ZHANG Yong-Qing,SUN Jun-Tao,GUO Xiao-Hui,XIAO Fu-Gang. Establishment of internal standard method for detection of plant-derived components in food with ladder-type melting temperature isothermal amplification[J]. Journal of Food Safety & Quality, 2021, 12(21): 8439-8445 |
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| Authors: | WANG De-Guo ZHANG Meng WANG Yong-Zhen ZHANG Yong-Qing SUN Jun-Tao GUO Xiao-Hui XIAO Fu-Gang |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Biomarker Based Rapid-Detection Technology for Food Safety oh Henan Province,School of Food and Biological Engineering,Henan University of Science and Technology,Luoyang,Key Laboratory of Biomarker Based Rapid-Detection Technology for Food Safety oh Henan Province,Key Laboratory of Biomarker Based Rapid-Detection Technology for Food Safety oh Henan Province,Key Laboratory of Biomarker Based Rapid-Detection Technology for Food Safety oh Henan Province,Key Laboratory of Biomarker Based Rapid-Detection Technology for Food Safety oh Henan Province,Key Laboratory of Biomarker Based Rapid-Detection Technology for Food Safety oh Henan Province |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ladder-type Melting Temperature Isothermal Amplification (LMTIA) Plant-derived Components Specific Gene Internal Standard Method DNA Extraction Method |
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