Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数 |
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引用本文: | 仇有文,张明辉,高学军,曲波,敖金霞,袁肖寒,刘营,霍楠.Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数[J].Canadian Metallurgical Quarterly,2011,39(17). |
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作者姓名: | 仇有文 张明辉 高学军 曲波 敖金霞 袁肖寒 刘营 霍楠 |
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作者单位: | 东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030 |
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基金项目: | 哈尔滨市科技局项目,转基因重大专项课题子课题 |
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摘 要: | 目的采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源nos终止子基因的拷贝数.方法]以大豆凝集素基因为内参照基因,以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品,通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的Ct值与拷贝数对数值的相关性标准曲线方程,并通过将得到的Ct值代入标准曲线方程求取了样品的拷贝数.结果]内参照基因标准曲线方程为y=-3.422x+35.201,R2=0.998;外源基因标准曲线方程为y=-3.348x+34.890,R2=0.999.nos终止子基因及其下游边界序列在转基因杂交大豆中为单拷贝.结论]为确定转基因大豆外源基因拷贝数提供了理论依据.
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关 键 词: | Real-time PCR 转基因杂交大豆 拷贝数 Lectin nos终止子基因边界序列 |
Detection of Foreign Gene Copies in Transgenic Soybean by Taqman Quantitative PCR Technique |
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