绿色木霉葡聚糖内切酶Ⅰ(EGⅠ)基因克隆与表达 |
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引用本文: | 陈红漫,张璐,李艳秋,阚国仕,任大明.绿色木霉葡聚糖内切酶Ⅰ(EGⅠ)基因克隆与表达[J].中国酿造,2012,31(7):114-116. |
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作者姓名: | 陈红漫 张璐 李艳秋 阚国仕 任大明 |
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作者单位: | 沈阳农业大学生物科技学院,辽宁沈阳,110186 |
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摘 要: | 绿色木霉Sn-9106是一株分解纤维素能力较强、能利用秸秆固体发酵生产纤维素酶的工业菌株.通常丝状真菌纤维素酶合成受纤维素、槐二糖等的诱导.本研究利用秸秆粉诱导绿色木霉Sn-9106纤维素酶基因,在诱导3.5d时,纤维素酶组分之一——葡聚糖内切酶Ⅰ的mRNA转录达到峰值,收集菌丝提取总RNA,以单链cDNA为模板,PCR扩增获得编码葡聚糖内切酶Ⅰ基因(egl1),去除信号肽序列后构建重组质粒PET-egl1,实现其在大肠杆菌中的表达,所得重组葡聚糖内切酶经组氨酸标签亲和层析纯化得到单一的E-GI蛋白,SDS-PAGE检测为49ku,活力为2.37U/mL.
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关 键 词: | 绿色木霉 纤维素酶 葡聚糖内切酶 原核表达 |
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