高产α-酮戊二酸解脂亚洛酵母的选育及其发酵过程优化 |
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引用本文: | 房峻,周景文,曾伟主.高产α-酮戊二酸解脂亚洛酵母的选育及其发酵过程优化[J].食品与发酵工业,2021(2):137-144. |
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作者姓名: | 房峻 周景文 曾伟主 |
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作者单位: | 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室;江南大学未来食品科学中心 |
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基金项目: | 国家重点研发计划项目(2019YFA0904800);国家自然科学基金优秀青年基金项目(21822806)。 |
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摘 要: | 为了提高解脂亚洛酵母(Yarrowia lipolytica)发酵生产α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid,α-KG)的效率,对前期获得的1株α-酮戊二酸高产菌株1-C6进行了迭代诱变处理,并对最终获得的高产突变菌株进行了系统的发酵过程优化。首先,基于前期构建的高通量筛选方法,应用甲基磺酸乙酯(ethylmethylsulfone,EMS)、亚硝基胍(nitroso-guanidin,NTG)和紫外(ultraviolet,UV)等诱变方法对菌株1-C6进行迭代诱变,最终获得了1株高产突变菌株4-E2,其α-KG的产量相对出发菌株1-C6提高了56.7%。在3 L发酵罐水平上研究了搅拌转速、通风比、乙酸钠和CaCO 3添加量等条件对高产突变菌株4-E2积累α-KG的影响。结果表明,较高转速的两阶段通风比更适合于α-KG的生产,乙酸钠和CaCO 3的最佳添加量分别为6 g/L和10 g/L。在此基础上进行补料发酵策略的探索,确定了恒速连续补料发酵的策略,α-KG产量达75.86 g/L,相比分批发酵提高了44.4%。研究结果为促进发酵法生产α-KG的工业化提供了借鉴意义。
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关 键 词: | 解脂亚洛酵母 Α-酮戊二酸 诱变 高通量筛选 补料策略 |
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