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两种酶标抗体制备方法的比较及李斯特菌TASELISA试剂盒性能的优化
引用本文:刘雅莉,刘芳,刘箐,韩舜愈,孙志博,夏俊芳,朱小清. 两种酶标抗体制备方法的比较及李斯特菌TASELISA试剂盒性能的优化[J]. 食品工业科技, 2012, 33(15): 301-306,310
作者姓名:刘雅莉  刘芳  刘箐  韩舜愈  孙志博  夏俊芳  朱小清
作者单位:1. 兰州大学第二医院,甘肃兰州730030/甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州730070/上海理工大学医疗器械与食品学院,上海200093
2. 甘肃出入境检验检疫局国际旅行卫生保健中心,甘肃兰州,730020
3. 上海理工大学医疗器械与食品学院,上海,200093
4. 甘肃农业大学食品科学与工程学院,甘肃兰州,730070
5. 兰州大学基础医学院,甘肃兰州,730000
6. 甘肃出入境检验检疫局,甘肃兰州,730020
摘    要:研制一种低成本、快速、准确的三抗体夹心酶联免疫(Three antibodies sandwich ELISA,TAS-ELISA)检测试剂盒。采用戊二醛法、改良过碘酸钠法分别制备碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,AP)、辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)标记的山羊抗兔IgG,比较单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)TAS-ELISA试剂盒两种酶标抗体的检测效果,并考察了试剂盒的检测灵敏度、特异性、稳定性、保存周期等指标。结果表明,采用改良过碘酸钠法制备的HRP-IgG效果好,克分子比最高可达2.9,酶结合率达27%;试剂盒检测周期6h,检测成本为3.5元/孔,特异性实验、干扰实验、重复性实验、稳定性实验表明采用该方法制备的酶标抗体,特异性好、结果稳定可靠。自制TAS-ELISA试剂盒检测性能可达到商业化试剂盒水平,为该产品的产业化提供了一定的理论依据。

关 键 词:单核细胞增生性李斯特菌  改良过碘酸钠法  碱性磷酸酶  辣根过氧化物酶  三抗体夹心ELISA

Comparison of two methods in preparation of enzyme conjugates and optimization of Listeria monocytogenes TAS-ELISA KIT
Abstract:
Keywords:Listeria monocytogenes  improved periodate method  AP  HRP  TAS-ELISA
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