针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法研究 |
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引用本文: | 胡胜,胡哲,汪方奎.针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法研究[J].山东化工,2024(3):151-154. |
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作者姓名: | 胡胜 胡哲 汪方奎 |
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作者单位: | 1. 公安部鉴定中心现场物证溯源技术国家工程实验室法医遗传学公安部重点实验室;2. 华中农业大学农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室 |
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摘 要: | 开发了一种针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法。该方法首先利用体积分数1%非离子型表面活性剂NP-40能够选择性破坏细胞膜而维持细胞核完整性的特征,实现了细胞的轻柔裂解和细胞核完整性的维持;其次通过差速离心,实现细胞核(核基因组)与线粒体基因组的同步分离。经过显微成像观察,核酸蛋白分析仪检测以及PCR分析,实现了从102到106个悬浮培养细胞中高质量线粒体基因组的分离纯化。本方法获取的线粒体基因组无核基因组污染,为后续开展线粒体群体遗传分析、线粒体疾病诊断提供了一种高效、快速、低成本的解决方案。
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关 键 词: | 线粒体分离纯化 微量细胞 NP40缓冲液 |
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