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一株产谷氨酰胺转氨酶菌株的分离、鉴定及其tgl的克隆表达
引用本文:张莹莹,石楠,杜萍萍,申培立,李志辉,于宏伟,卢海强,苏旭东,张伟. 一株产谷氨酰胺转氨酶菌株的分离、鉴定及其tgl的克隆表达[J]. 食品工业科技, 2015, 36(11)
作者姓名:张莹莹  石楠  杜萍萍  申培立  李志辉  于宏伟  卢海强  苏旭东  张伟
作者单位:1. 河北农业大学食品科技学院,河北省农产品加工工程技术中心,河北保定071001
2. 河北农业大学食品科技学院,河北省农产品加工工程技术中心,河北保定071001;河北大学生命科学学院,河北保定071002
摘    要:用稀释平板法从土壤样品中分离到166株细菌菌株,通过凝胶法初筛和Folk比色法复筛,得到一株产谷氨酰胺转氨酶(transglutaminase,TGase)的菌株,通过形态学、生理生化特征和16S r DNA序列比对证明该菌株是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为TGase1318。克隆了该菌株TGase的编码基因tgl,序列长738bp,编码由245个氨基酸组成的蛋白质;TGase的氨基酸序列与NCBI公布的B.subtilis的TGase相似性达94%~100%。用B.subtilis表达载体p TZ和E.coli表达载体p ET21b分别构建了含tgl的重组质粒,转化B.subtilis WB800和E.coli BL21,tgl基因表达产物在70℃下可催化BSA交联,表明tgl在B.subtilis和E.coli中获得了表达且表现出TGase活性,这为其在食品工业上的开发利用打下基础。

关 键 词:谷氨酰胺转氨酶  枯草芽孢杆菌  克隆和表达  16S rDNA

Isolation and identification of a transglutaminase producing strain and its tgl cloning and expression
Abstract:
Keywords:transglutaminase  Bacillus subtilis  cloning and expression  16S rDNA
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