| 人s△BAFF的高效原核表达及纯化 |
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| 引用本文： | 黄刚,何凤田,李蓉芬,高会广,陈麟凤,龚薇,胡颖,胡大强.人s△BAFF的高效原核表达及纯化[J].粉末涂料与涂装,2006,19(2):130-133. |
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| 作者姓名： | 黄刚 何凤田 李蓉芬 高会广 陈麟凤 龚薇 胡颖 胡大强 |
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| 作者单位： | 第三军医大学生物化学与分子生物学教研室,重庆 400038 |
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| 摘 要： | 目的克隆TNF家族B细胞激活因子（B cell activating factor to the TNF family,BAFF）胞外区134～285（sBAFF134-285）氨基酸残基段缺失突变体（s△BAFF）的cDNA,并进行表达及纯化.方法以构建的重组质粒pUC19/sBAFF为模板,采用一步反向PCR法,扩增缺失编码sBAFF的142～160位氨基酸的核苷酸序列.经测序证实后,克隆入原核表达载体pQE-80L.经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,Ni2＋-NTA柱层析纯化目的蛋白.结果经一步反向PCR扩增后得到401 bp的DNA片段,该片段序列与GenBank报道的编码人△BAFF的胞外区（s△BAFF）cDNA序列一致.含s△BAFF的表达载体在大肠杆菌中可表达出相对分子质量为18 000的蛋白质并以包涵体的形式存在,经Ni2＋-NTA柱层析纯化后得到高纯度的目的蛋白.结论已成功地制备出人s△BAFF蛋白,为其功能的研究创造了条件.
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| 关 键 词： | TNF家族B细胞激活因子 cDNA克隆 原核表达 |
| 收稿时间： | 2005-09-29 |
| 修稿时间： | 2005年9月29日 |
High Prokaryotic Expression and Purification of Human s△BAFF |
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| HUANG Gang, HE Feng-tian, LI Rong-fen, et al.High Prokaryotic Expression and Purification of Human s△BAFF[J].Chinese Journal of Biologicals,2006,19(2):130-133. |
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| Authors: | HUANG Gang HE Feng-tian LI Rong-fen |
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