黑曲霉Ⅲ与绿色木霉Ⅰ混合发酵产纤维素酶的分离纯化及酶学性质研究

对黑曲霉Ⅲ与绿色木霉Ⅰ混合发酵所产纤维素酶进行了分离纯化，并对其酶学性质进行了研究。通过硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-100 凝胶柱层析，得到 5 个洗脱峰，其中峰 2 含内切葡聚糖苷酶和外切葡聚糖苷酶，且内切葡聚糖苷酶活最高；峰 3 含内切酶、外切酶及 ?-葡萄糖苷酶，酶系较全；峰 5 含内切酶和外切酶；峰 1 和峰 4 没有纤维素酶活性。采用 DEAF FF 弱阴离子交换柱层析对峰 2 进行了分离纯化，从中分离纯化得到一种内切葡聚糖苷酶组分，经 SDS-PAGE 电泳分析，其分子量为 61.5 KD。酶学性质研究结果表明，CMC 酶活在 pH4.0～6.0 的条件下，可保持初始酶活的 70 %～80 %，最适酶反应 pH 为 5.0；温度在 30～50 ℃范围内，酶活较高，最适酶反应温度为 50 ℃，若超过 60 ℃，酶活迅速下降。