| Picrophilus Torridus嗜热酯酶的克隆表达及性质研究 |
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| 引用本文： | 杜晓韵,张兴群,张晓彦.Picrophilus Torridus嗜热酯酶的克隆表达及性质研究[J].食品与药品,2019(3):169-173. |
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| 作者姓名： | 杜晓韵 张兴群 张晓彦 |
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| 作者单位： | 东华大学化学化工与生物工程学院;华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(21506055);国家自然科学基金(51863020) |
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| 摘 要： | 目的目的以Picrophilus torridus DSM9790基因组为模板,克隆嗜热酯酶EstPt 1的基因,实现其在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达,并对重组EstPt 1进行酶学性质表征。方法利用PCR扩增,获得EstPt 1基因,连接到pET-28a(+)质粒,将重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)中,构建重组工程菌株。通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),对硝基苯酚法(pNPB),薄层色谱(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)对EstPt 1的性质进行研究。结果EstPt 1成功表达,分子量为35 kD;最适反应温度为85℃,最适pH 9.0,有良好的热稳定性和酶活,能在24 h内完全降解5 mmol/L邻苯二甲酸二丁酯(DBP)。结论重组EstPt 1有很强的高温耐受性和稳定性,以及良好的DBP降解活性。
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| 关 键 词： | 邻苯二甲酸酯 嗜热酯酶 酶学性质 |
Cloning,Expression and Characterization of Thermophilic Esterase from Picrophilus Torridus DSM9790 |
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| DU Xiao-yun,ZHANG Xing-qun,ZHANG Xiao-yan.Cloning,Expression and Characterization of Thermophilic Esterase from Picrophilus Torridus DSM9790[J].Food and Drug,2019(3):169-173. |
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| Authors: | DU Xiao-yun ZHANG Xing-qun ZHANG Xiao-yan |
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| Affiliation: | (College of Chemistry,Chemical Engineering and Biotechnology,Donghua University,Shanghai 201620,China;State Key Laboratory of Bioreactor Engineering,East China University of Science and Technology,Shanghai 201620,China) |
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| Abstract: | DU Xiao-yun;ZHANG Xing-qun;ZHANG Xiao-yan(College of Chemistry,Chemical Engineering and Biotechnology,Donghua University,Shanghai 201620,China;State Key Laboratory of Bioreactor Engineering,East China University of Science and Technology,Shanghai 201620,China) |
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| Keywords: | PAE thermophilic esterase enzymatic property |
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