| 荧光PCR法检测原料乳中大肠埃希氏菌喹诺酮类的耐药基因 |
| |
| 引用本文： | 赵琳娜,刘 娜,王学硕,崔生辉,路 勇.荧光PCR法检测原料乳中大肠埃希氏菌喹诺酮类的耐药基因[J].食品安全质量检测技术,2021,12(14):5629-5635. |
| |
| 作者姓名： | 赵琳娜 刘 娜 王学硕 崔生辉 路 勇 |
| |
| 作者单位： | 中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院,中国食品药品检定研究院 |
| |
| 基金项目： | 科技部“食品安全关键技术研发”重点专项项目(2018YFC1604303) |
| |
| 摘 要： | 目的 建立喹诺酮类抗生素主要耐药基因的TaqMan荧光PCR检测方法,为原料乳中耐药大肠埃希氏菌的监测提供技术方案。方法 利用Chelex 100法快速获取细菌基因组DNA,通过对aac(6’)-Ib-cr和qepA基因的序列分析,利用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,建立单重和双重TaqMan荧光PCR方法。通过耐药基因阳性菌株和原料乳中分离大肠埃希氏菌菌株,对方法进行评估。结果 以Chelex 100法快速提取耐药基因阳性菌株细菌基因组DNA为模板,建立的aac(6’)-Ib-cr和qepA基因的单重和双重荧光PCR反应均有特异性曲线扩增,方法灵敏度为菌液浓度10-4 CFU/mL。北京地区52份原料乳中共分离出32株大肠埃希氏菌,利用建立的双重荧光PCR方法检测aac(6’)-Ib-cr和qepA基因结果为阴性,和环丙沙星肉汤稀释法药敏结果一致。结论 本方法的建立为原料乳中大肠埃希氏菌常见喹诺酮类耐药基因的快速检测提供了新的技术手段。
|
| 关 键 词： | 大肠埃希氏菌 氟喹诺酮类抗菌药 耐药基因 双重荧光PCR |
| 收稿时间： | 2021/4/21 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2021/7/15 0:00:00 |
Determination of quinolones-resistance genes in raw milk-derived Escherichia coli real-time fluorescence PCR |
| |
| ZHAO Lin-N,LIU N,WANG Xue-Shuo,CUI Sheng-Hui,LU Yong.Determination of quinolones-resistance genes in raw milk-derived Escherichia coli real-time fluorescence PCR[J].Food Safety and Quality Detection Technology,2021,12(14):5629-5635. |
| |
| Authors: | ZHAO Lin-N LIU N WANG Xue-Shuo CUI Sheng-Hui LU Yong |
| |
| Affiliation: | National Institutes for Food and Drug Control,National Institutes for Food and Drug Control,National Institutes for Food and Drug Control,National Institutes for Food and Drug Control |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Escherichia coli fluoroquinolones Drug resistance genes double real-time fluorescence PCR |
|
| 点击此处可从《食品安全质量检测技术》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《食品安全质量检测技术》下载全文 |
|
