亲水有机溶剂-盐双水相体系分离乳清蛋白抗氧化性多肽

为建立一种快速高效分离乳清蛋白胃蛋白酶水解液中的抗氧化肽的方法,采用基于有机溶剂-盐的双水相体系进行分离。以上相多肽提取率和ABTS自由基清除率为评价指标,结合反相-高效液相色谱(RP-HPLC)检测,探究多肽的分配规律,确定最优分离条件。对上、下相和水解液中多肽进行纯化,分别测定其ABTS自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力以及还原能力,并用基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF)和液相色谱对纯化后多肽进行表征。结果表明:双水相体系分离抗氧化肽的最优条件为加入4mL 25%NaH_2PO_4,3 mL正丙醇,NaCl 0.75 g/10 m L,此时,大多数的抗氧化性多肽被分配到双水相上相中,且纯化后上相多肽各项抗氧化值均高于下相及水解液多肽。结论:亲水有机溶剂-盐双水相体系可对水解液中抗氧化性多肽进行分离富集,且效果良好。