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沙蚕活性蛋白酶诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的机制研究
引用本文:张国梅,杨最素,丁国芳,黄芳芳,赵玉勤. 沙蚕活性蛋白酶诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的机制研究[J]. 现代食品科技, 2015, 31(3): 6-11
作者姓名:张国梅  杨最素  丁国芳  黄芳芳  赵玉勤
作者单位:(1.浙江海洋学院食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山 316022),(1.浙江海洋学院食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山 316022),(1.浙江海洋学院食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山 316022)(2.浙江省海洋水产研究所,浙江舟山 316021),(1.浙江海洋学院食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山 316022),(1.浙江海洋学院食品与医药学院,浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心,浙江舟山 316022)
基金项目:国家自然科学基金面上项目(81273429);浙江省科技厅重大专项(2011C02003,2010R50029,2013C03036);浙江省自然科学基金立项(LY12C20005,LY12C20008);舟山市科技计划项目(2012C21013,2012C23023);
摘    要:本文探讨了沙蚕活性蛋白酶(Nereis active protease,NAP)诱导SPC-A-1细胞凋亡机制。采用MTT法检测NAP对SPC-A-1细胞的抑制作用,倒置显微镜及AO/EB染色观察SPC-A-1细胞的形态学的变化,采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率和细胞膜电位的变化;并通过Western Blotting检测细胞中凋亡相关蛋白的表达变化。NAP对SPC-A-1细胞活性具有明显的抑制作用且呈现剂量和时间的依赖性;NAP作用后细胞出现凋亡的形态学特征;经流式细胞术检测结果显示,随着NAP作用浓度的增加,SPC-A-1细胞的早期凋亡率从13.50%提高到22.98%,且线粒体膜电位下降所占的百分率从12.95%提高到25.28%。Western Blotting结果显示,50μg/mL NAP作用24h后,Bax/Bcl-2的比率相对对照组明显增加了6.05倍;Cyt-C、Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP等含量显著上调,相对表达量分别达到对照组的2.32、3.07、3.68、1.36倍。NAP诱导SPC-A-1细胞凋亡的作用机理有可能是通过下调Bcl-2蛋白的表达、上调Bax蛋白的表达,进而诱导线粒体膜电位的下降,促使Cyt-C的转移以及激发Caspase家族发生级联反应最终导致SPC-A-1细胞的凋亡。

关 键 词:海洋药物  沙蚕  蛋白酶  抗肺癌  细胞凋亡
收稿时间:2014-08-05

The Mechanism of Nereis Active Protease-induced Apoptosis in Lung Cancer SPC-A-1 Cells
ZHANG Guo-mei,YANG Zui-su,DING Guo-fang,HUANG Fang-fang and ZHAO Yu-qing. The Mechanism of Nereis Active Protease-induced Apoptosis in Lung Cancer SPC-A-1 Cells[J]. Modern Food Science & Technology, 2015, 31(3): 6-11
Authors:ZHANG Guo-mei  YANG Zui-su  DING Guo-fang  HUANG Fang-fang  ZHAO Yu-qing
Affiliation:(1.School of Food Science and Pharmacy of Zhe Jiang Ocean University, Zhejiang Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Biomedical Products, Zhoushan 316022, China),(1.School of Food Science and Pharmacy of Zhe Jiang Ocean University, Zhejiang Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Biomedical Products, Zhoushan 316022, China),(1.School of Food Science and Pharmacy of Zhe Jiang Ocean University, Zhejiang Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Biomedical Products, Zhoushan 316022, China) (2.Zhejiang Marine Fisheries Research Institution, Zhoushan 316021, China),(1.School of Food Science and Pharmacy of Zhe Jiang Ocean University, Zhejiang Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Biomedical Products, Zhoushan 316022, China) and (1.School of Food Science and Pharmacy of Zhe Jiang Ocean University, Zhejiang Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Biomedical Products, Zhoushan 316022, China)
Abstract:
Keywords:marine drugs   nereis   protease   anti-cancer   apoptosis
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