柞蚕滞育关联蛋白基因dap2的表达特征及分子特性 |
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引用本文: | 杨晓丽,毕臻乐,舒特俊,陈剑清,张耀洲,陈健.柞蚕滞育关联蛋白基因dap2的表达特征及分子特性[J].浙江理工大学学报,2014(11). |
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作者姓名: | 杨晓丽 毕臻乐 舒特俊 陈剑清 张耀洲 陈健 |
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作者单位: | 浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所;天津市国际生物医药联合研究院; |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划“863”项目(2011AA100603) |
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摘 要: | 滞育关联蛋白(DAP)在昆虫滞育进程中可能发挥重要作用。从NCBI获取柞蚕滞育关联蛋白基因2(Antheraea pernyi diapause-associated protein 2,dap2)的序列,序列分析表明该基因的cDNA全长1 187bp,ORF为874bp,编码278个氨基酸。NCBI数据库氨基酸序列比对,DAP2与烟草天蛾和家蚕的眼色素结合蛋白(omminbinding protein,OBP)同源性分别达到57%和58%。通过荧光定量PCR和Western blotting方法,分别检测柞蚕不同发育时期和五龄幼虫不同组织中dap2的转录表达水平,结果表明dap2在滞育蛹中转录和表达水平最高;在5龄幼虫不同组织中的分析表明其转录水平在脂肪体和血淋巴中最高,在翻译水平上血淋巴中表达最高。分离纯化后,对天然DAP2蛋白分子特性进行初步研究,吸收光谱分析不能表明其携带色素,去糖基化修饰分析表明其为糖蛋白,双向电泳表明其可能存在三种不同程度的翻译后修饰,推测其可能是柞蚕的一种眼色素结合蛋白(ommin-binding protein,OBP)。
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关 键 词: | 柞蚕 滞育关联蛋白 眼色素结合蛋白 荧光定量PCR 免疫印迹分析 |
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