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黑松露成分TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立与应用
引用本文:杨爱馥,孙赟,万超,刘雪华,邰丽梅,王玫.黑松露成分TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立与应用[J].中国食品学报,2023,23(7):403-409.
作者姓名:杨爱馥  孙赟  万超  刘雪华  邰丽梅  王玫
作者单位:大连海关技术中心 辽宁大连 116001;中华全国供销合作总社昆明食用菌研究所 昆明 650033
基金项目:海关技术规范制(修)订计划项目(2020B160);海关总署科研项目(2021HK189);大连海关科研项目(2021DK10,2022DK05)
摘    要:以黑松露核糖体内转录间隔区基因为靶基因设计特异性引物和探针,建立黑松露成分的TaqMan实时荧光PCR检测方法,并进行物种特异性验证。同时对不同掺入比例的模拟样品和市售黑松露及制品进行检测。结果表明:该方法特异性强,仅对黑松露基因组DNA出现特异性扩增曲线,与其它食用菌和异源性动植物样品无非目标扩增;检测灵敏度为1×10-3 ng/μL黑松露基因组DNA或质量分数0.01%的黑松露粉。对120份市售黑松露(鲜品、冻品、干品、粉末)、黑松露制品(黑松露酱和黑松露调味粉)以及不含黑松露成分的杂菌包进行检测,在70份黑松露(鲜品、冻品、干品、粉末)和10份黑松露制品中检出黑松露成分,其它样品均未检出黑松露成分,检测结果与商品标识一致。该方法灵敏度高,特异性强,可快速精准地进行黑松露成分的真实性甄别。

关 键 词:黑松露    ITS基因    TaqMan实时荧光PCR    快速检测
收稿时间:2022/7/27 0:00:00

Development and Application of a TaqMan Real-time PCR Assay for Rapid Detection of Black Truffles Derived Ingredients
Yang Aifu,Sun Yun,Wan Chao,Liu Xuehu,Tai Limei,Wang Mei.Development and Application of a TaqMan Real-time PCR Assay for Rapid Detection of Black Truffles Derived Ingredients[J].Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology,2023,23(7):403-409.
Authors:Yang Aifu  Sun Yun  Wan Chao  Liu Xuehu  Tai Limei  Wang Mei
Abstract:
Keywords:
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