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凡纳滨对虾抗菌肽的筛选及与DNA的结合机制
引用本文:王铭遥,郑明静,任中阳,石林凡,邓尚贵,杨燊.凡纳滨对虾抗菌肽的筛选及与DNA的结合机制[J].中国食品学报,2023,23(7):140-151.
作者姓名:王铭遥  郑明静  任中阳  石林凡  邓尚贵  杨燊
作者单位:集美大学海洋食品与生物工程学院 福建厦门 361021;集美大学海洋食品与生物工程学院 福建厦门 361021;福建省食品微生物与酶工程重点实验室 福建厦门 361021;大连工业大学 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心 辽宁大连 116034;浙江兴业集团 浙江舟山 316014
基金项目:国家重点研发计划项目(2020YFD09009)
摘    要:探究凡纳滨对虾中一种新型抗菌肽PV13对副溶血性弧菌的抑菌活性及与DNA的结合机制。采用超高效液相色谱-质谱联用技术鉴定凡纳滨对虾体内小分子多肽序列,并采用生物信息学从序列库中分析、筛选得到阳离子抗菌肽PV13(ALPWVLPWALPRALPRVLPR)。通过最低抑菌浓度(MIC)和时间杀伤曲线(Time-kill)测定抗菌肽PV13对副溶血性弧菌的MIC为62.5 μg/mL,可在2 h内将副溶血性弧菌全部杀灭。采用透射电子显微镜观察、细胞内膜通透性测定、DNA凝胶阻滞和圆二色谱仪等评价抗菌肽对副溶血性弧菌的抑菌机制。结果表明,抗菌肽PV13能增加副溶血性弧菌细胞膜内膜的通透性,使得细胞膜变薄,从而进入细胞,与基因组DNA结合来体现其抑菌活性,二者结合程度与肽浓度呈正相关。抗菌肽PV13在PBS和SDS溶液中均呈无规则卷曲结构,与副溶血性弧菌基因组DNA结合后,色谱吸收峰发生明显变化。推测序列中4个重复的亮氨酸-脯氨酸区域可能是其抑菌活性功能域。上述结果对凡纳滨对虾中抗菌肽的筛选及其分子设计具有指导意义,同时也为抗菌肽PV13作为食品新型防腐剂的应用提供理论支持。

关 键 词:凡纳滨对虾    副溶血性弧菌    抗菌肽    抑菌活性    DNA结合机制
收稿时间:2022/7/16 0:00:00

Antimicrobial Peptides Screened from Penaeus vannamei Shrimp and Investigation of Their DNA Binding Mechanism
Wang Mingyao,Zheng Mingjing,Ren Zhongyang,Shi Linfan,Deng Shanggui,Yang Shen.Antimicrobial Peptides Screened from Penaeus vannamei Shrimp and Investigation of Their DNA Binding Mechanism[J].Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology,2023,23(7):140-151.
Authors:Wang Mingyao  Zheng Mingjing  Ren Zhongyang  Shi Linfan  Deng Shanggui  Yang Shen
Abstract:
Keywords:
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