破壁方法对红球菌11-3胞内几丁质脱乙酰酶释放的影响

红球菌11-3是一株高产几丁质脱乙酰酶(CDA)的菌株，几丁质在该酶的催化作用下可转化为壳聚糖，该酶在壳聚糖的生产中具有重要作用。红球菌11-3菌株所产CDA为胞内酶，成为催化反应的一大障碍。为了提高CDA的释放率，本研究首先利用不同的物理方法(反复冻融、超声、球磨、匀浆和液氮研磨)、化学方法(表面活性剂处理、氯仿处理)和生物学方法(溶菌酶处理)对红球菌11-3进行破壁处理，测定CDA酶活力和释放率，并通过扫描电子显微镜观察细胞形态变化。结果表明，不同方法的破壁效果存在很大差异，其中，液氮研磨法破壁效果最佳，菌体表面出现细密的孔洞，CDA释放率为45.13%，总酶活力损失率为2.03%；匀浆处理法次之，CDA释放率为16.00%，总酶活力损失率为9.18%。利用匀浆和液氮研磨联合处理红球菌11-3细胞，细胞表面产生更多、更大的孔洞，CDA释放率高达86.17%，总酶活力损失率为9.11%，上清液中CDA酶活力为480.2 U/mL，较液氮研磨法相比提高了1.48倍。结论:匀浆和液氮研磨联合处理可有效破坏红球菌11-3细胞壁，提高胞内CDA释放效率。本研究结果对红球菌11-3内CDA应用于壳聚糖的生产具有参考作用。

from Rhodococcus sp. 11-3