静电耦合亲和层析纯化人血清白蛋白的研究 |
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引用本文: | 王思栋,王留洋,冯雪,张松平,张万忠,罗坚.静电耦合亲和层析纯化人血清白蛋白的研究[J].过程工程学报,2023(11):1599-1607. |
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作者姓名: | 王思栋 王留洋 冯雪 张松平 张万忠 罗坚 |
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作者单位: | 1. 沈阳化工大学制药与生物工程学院;2. 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室 |
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基金项目: | 科技部重点研发计划(编号:2021YFC2103402);;国家自然科学基金资助项目(编号:21821005); |
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摘 要: | 人血清白蛋白(Human Serum Albumin,HSA)是人血清中含量最丰富的蛋白,约占血清总蛋白含量的40%~60%。商品化的白蛋白亲和介质(Cibacron Blue F3GA)的配基毒性大、易脱落、载量低,纯化白蛋白回收率较低。本研究制备了一种新型静电耦合亲和介质(DASA-Sepharose,3,5-Diaminobenzoic Acid n-Octyl Succinic Anhydride-Sepharose),并通过一步层析从人血清中高效纯化白蛋白。DASA-Sepharose介质采用3,5-二氨基苯甲酸间隔臂将正辛基琥珀酸酐亲和配体偶联于琼脂糖微球。DASA-Sepharose间隔臂上的羧基通过静电作用吸附白蛋白,进而与正辛基琥珀酸酐亲和配基协同作用实现静电耦合亲和吸附,在保持亲和吸附高特异性的同时大大提高了吸附载量。采用牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)为模型蛋白考察了Na Cl浓度和溶液pH对介质静态吸附载量(Qm)的影响,NaCl浓度为0.025~0.06 mol/L时Qm几乎不受影响,...
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关 键 词: | 人血清白蛋白 静电耦合亲和层析 3 5-二氨基苯甲酸 正辛基琥珀酸酐 间隔臂 静电吸附 |
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