北川白山羊血液中总DNA的不同提取条件对PCR的影响 |
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作者姓名: | 刘文静 张廷华 |
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作者单位: | 西南科技大学生命科学与工程学院,四川绵阳621010 |
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基金项目: | 西南科技大学人才启动费资助项目(023114). |
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摘 要: | 对35只北川白山羊血液中总DNA提取并根据普通牛已知的κ—CN基因序列设计一对引物进行扩增,对影响PCR反应结果的因素进行了比较分析。结果表明:蛋白酶K终浓度为0.05mg/mL,饱和酚-氯仿抽提3次、每次30min,采用乙醇沉淀DNA时,DNA产量最低,PCR反应无特异条带;蛋白酶K终浓度为0.1mg/mL,饱和酚一氯仿抽提1次、每次5min,分别采用超速离心和乙醇沉淀DNA时,DNA产量最高,PCR反应有特异条带(350bp),但前者出现引物二聚体,故作PCR反应时选择后者沉淀最佳。
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关 键 词: | 北川白山羊 DNA浓度 PCR |
文章编号: | 1671-8755(2007)04-0083-03 |
收稿时间: | 2007-05-14 |
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