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cpcB与CT融合蛋白表达质粒在大肠杆菌中的表达和纯化
引用本文:王玉梅,张学成,周一江,隋正红,茅云翔. cpcB与CT融合蛋白表达质粒在大肠杆菌中的表达和纯化[J]. 高技术通讯, 2005, 15(5): 62-66
作者姓名:王玉梅  张学成  周一江  隋正红  茅云翔
作者单位:中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003;中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003;中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003;中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003;中国海洋大学海洋生命学院,青岛,266003
基金项目:863计划 (819 0 4 10 )资助项目
摘    要:将人和鲑鱼嵌合型降钙素基因与藻蓝蛋白的β亚基基因相连,插入融合表达载体pGEX-4T-3中,转化大肠杆菌BL21。融合蛋白cpcB-CT基因在IPTG诱导下获得高效表达。超声破碎后,经SDS-PAGE分析,在48kD处有新增条,灰度扫描测定,过表达蛋白量占50%~60%,85%为包涵体。包涵体经变性、复性,过Glutathion-Sepharose-4B亲和吸附柱,获含有GST。的融合蛋白,该蛋白经凝血酶消化和截留分离,获得纯化的融合蛋白cpcBCT。Western blotting分析表明,产物具有与合成人降钙素相似的抗原决定簇部分;ELISA-受体法和大鼠降血钙试验表明,其具有降血钙作用。提示该融合蛋白可能具有良好的应用前景。

关 键 词:降钙素  藻蓝蛋白β亚基  融合蛋白  降血钙活性

Construction and expression of cpcB-CT fused gene in E.coli
Wang Yumei,Zhang Xuecheng,Zhou Yijiang,Sui Zhenghong,Mao Yunxiang. Construction and expression of cpcB-CT fused gene in E.coli[J]. High Technology Letters, 2005, 15(5): 62-66
Authors:Wang Yumei  Zhang Xuecheng  Zhou Yijiang  Sui Zhenghong  Mao Yunxiang
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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